该方法以放射免疫测定的竞争性结合原理为基础。标准品和未知样品包被管中一起温育，抗体包被于试管底部。温育后将管内物质吸出或倒出，计数。在1～60μg/dl 范围内，以5 个血清标准坐标准曲线，未知样品值可从标准曲线中查得。整个反应在包被管中进行。对于血清，尿液或血浆样本来说，未分离样本的稀释，蛋白质的变性或提取步骤是必须的。除了非提取尿皮质醇分析外，该药盒也可用于尿液中游离皮质醇的测定。首先用亚甲基氯化物提取尿液中皮质醇，将提取物的一个等份式样在包被管中直接脱水（试验证明如果使用的亚甲基氯化物，不会有损于包被管）。为确保样本中含有适当水平的蛋白质，向每个包被管中加入10μl 皮质醇血清空白，其余测定过程同血清，血浆和非提取尿皮脂醇。应监控使用亚甲基氯化物提取尿中皮)

　　放射免疫（RIA）的优点

　　放射免疫分析具有许多其它分析方法*的优点。它既具有免疫反应的高特异性，又具有放射性测量的高灵敏度，因此能准确测定各种具有免疫活性的极微量的物质。

　　⒈灵敏度高一般化学分析法的检出极限为10～10g，而RIA通常为10ng（纳克，ng）、10pg（皮克，pg），甚至10fg（飞克，fg）、10ag（阿克，ag)。

　　⒉特异性强由于抗原—抗体免疫反应专一性强，所被测物一定是相应的抗原。良好的特异性抗体，能识别化学结构上非常相似的物质，甚至能识别立体异构体。

　　⒊应用范围广据不*统计，目前至少已有300多种生物活性物质已建立了RIA。它几乎能应用于所有激素的分析（包括多肽类和固醇类激素），还能用于各种蛋白质、肿瘤抗原、病毒抗原、细菌抗原、寄生虫抗原以及一些小分子物质（如环型核苷酸等）和药物（如毛地黄甙等）的分析，应用范围还在不断扩展。近年来由于小分子半抗原制备抗体的技术有很大的发展，有人预测几乎所有的生物活性物质，只要其含量不低于RIA的探测极限，都可建立适当的RIA法。

　　⒋操作简便RIA所需试剂品种不多，可制成配套试剂盒；加样程序简单一次能分析大量标本，标本用量也少；反应时间不长；测量和数据处理易于实现自动化；RIA属体外分析技术，对患者无任何辐射危害。

　　放射免疫法试剂盒有三大主要要素 :标记物、标准品和抗体。此外 ,质控血清也很重要 ,是否满足质控血清的要求是简便、直接的检验试剂盒可靠性的条件。当然 ,还有一些辅助组分 ,如分离剂、缓冲液等试剂也不能忽视。