在神经免疫疾病领域,MOG抗体相关疾病(MOGAD)和AQP4+视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)的诊断如同一场与时间的赛跑。然而,最新研究揭露了一个残酷现实:当前广泛使用的固定细胞检测法(FCBA),竟可能导致半数以上患者被漏诊!约翰霍普金斯大学与梅奥诊所的联合研究数据,为这一领域敲响了精准诊断的警钟。
FCBA法:使用进口试剂盒(Euroimmun kits)
LCBA法:送检梅奥诊所实验室,使用流式细胞术(FACS)
关键发现:
漏诊率惊人,FCBA成“隐形杀手"
研究分析了近600份血清样本,发现:
1. MOG-IgG检测
活细胞法(LCBA-FACS)灵敏度达95.1%,特异性97.7%;
固定细胞法(FCBA-IF)灵敏度仅45.7%,虽特异性高达99.8%,但会漏诊半数以上患者!
典型案例:在急性发作期(发病90天内),LCBA检测出100%的阳性样本,而FCBA仅检出51.6%。
2. AQP4-IgG检测
LCBA-FACS灵敏度为97.3%,特异性100%;
FCBA-IF灵敏度为71.6%,同样存在显著漏诊风险。
经典数据:在74例确定AQP4抗体阳性的NMOSD患者中 ,LCBA法共检测出72例,而FCBA法仅检测出53例,有足足21例患者被FCBA法漏诊!这种漏诊率是不容忽视的,平均每4名抗体阳性的NMOSD患者就有1人以上被误诊。
典型案例:在急性发作期(发病90天内),LCBA检测出97.3%的阳性样本,而FCBA仅检出63.6%。
为何FCBA表现如此糟糕?
梅奥诊所的活细胞转染CBA(LCBA)使用人胚胎肾细胞(HEK293)转染含绿色荧光蛋白和AQP4蛋白编码的质粒,重悬后细胞与稀释的患者血清共同孵育,洗涤后再加入含荧光标记的山羊二抗,在细胞表面抗原保持原构象和抗原性的基础上形成抗原抗体复合物,再经流式细胞仪对细胞的荧光强度进行分析。
而商品化试剂盒,或实验室自建固定细胞法存在以下致命缺陷:
抗原构象破坏:以甲醛为代表的固定剂会改变MOG/AQP4抗原的天然结构,导致抗体无法识别关键表位;
抗体亚型混杂:LCBA-FACS专门检测IgG1亚型(MOGAD主要抗体),而FCBA检测所有IgG亚型,可能混杂非致病性抗体。
许多文献将FCBA泛称为“CBA法",但国内外指南明确推荐的金标准是活细胞CBA法(LCBA)!
漏诊后果:从延误治疗到误入“双阴性"陷阱
治疗延误:AQP4+ NMOSD已有靶向药物(如依库珠单抗和萨特利珠单抗),作为一种高复发高致残的罕见病,漏诊导致的治疗延误可能会提高复发几率。一次症状发作就有高致残风险,给患者带来不可逆的神经损伤。
误诊风险:FCBA阴性患者可能被归类为“双阴性NMOSD",影响研究结论和治疗选择;
经济负担:漏诊导致的反复检查、误用药物,加重患者身心与经济压力。
ISO 13485认证:检测质量的“生命线"
⚠️ 活细胞法≠免死金牌!技术落地需体系护航
LCBA的临床价值,必须依托ISO 13485认证的严格质控!
- 为何必须认证?
细胞活性保存:未认证机构可能因培养条件不稳定,导致抗原失活;
操作标准化:从样本处理到结果判读,需全程可追溯;
外部质控验证:定期比对国际标准品,杜绝“自说自话"。
专家呼吁:
双重合规,拒绝“擦边球" !
1️.方法合规:
- 优先选择指南推荐的活细胞CBA法(LCBA);
2️. 体系合规:
- 认准ISO 13485认证机构!;
- 警惕“文献推荐"噱头——科研数据≠临床资质!
精准诊断,容不得半点妥协
神经免疫疾病的诊疗,是科学与生命的博弈。当固定细胞法漏诊率高达50%,当无资质机构以“活细胞法"之名行低质检测之实,患者承受的不仅是误诊风险,更是生存机会的流逝。
参考文献
Said Y, et al. Real-world clinical experience with serum MOG and AQP4 antibody testing by live versus fixed cell-based assay. *Ann Clin Transl Neurol*. 2025.