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IA-2抗体检测试剂盒检验方法
发布时间:2018-02-05   点击次数:461次
   IA-2抗体检测试剂原理:
  IA-2抗体检测试剂盒是采用猪瘟抗原包被微孔板,在试验中,加入稀释的对照血清和待检血清,经温育后,若样品中含有抗猪瘟病毒的特异性抗体,则将与检测板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,加入HF溶液终止反应后,用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD值。
  IA-2抗体检测试剂盒检验方法:
  1. 配液: 用蒸馏水或去离子水将1瓶浓缩洗涤液全部稀释至450ml。
  2. 编号: 将样本对应的微孔按序编号,每板设阴性对照3孔、阳性对照2孔和空白孔1孔(双波长测定可不设空白孔)。
  3. 加样: 每孔加100μl(或2滴)样本稀释液,空白孔不加。分别在相应的孔中加入样本或阴、阳对照10μl,轻轻振荡混匀。
  4. 温育: 用封板膜封板后放入37±1℃温箱温育45±1分钟。
  5. 洗涤: 小心揭掉封板膜,用洗板机洗涤5次(也可手工洗板),每次浸泡30秒,洗涤时各孔均需加满洗涤液,zui后一次在吸水纸上尽量拍干。
  6. 加酶: 摇匀后每孔加100μl(或2滴)酶结合物,空白孔不加,轻轻振荡混匀。
  7. 温育: 用另一张封板膜封板后放入37±1℃温箱温育30±1分钟。
  8. 洗涤: 操作同第5步。
  9. 显色: 每孔先加50μl(或1滴)显色剂A,然后加50μl(或1滴)显色剂B(包括空白孔),37±1℃避光显色10±1分钟。
  10.测定: 每孔加50μl(或1滴)终止液终止反应,轻轻振荡混匀,10分钟内在波长450nm下分别测定各孔的吸光值A值。(单波长酶标仪需空白孔调零,双波长酶标仪不需空白孔调零)。
  IA-2抗体检测试剂盒预期用途:本试剂盒用于检测待测血清或血浆样品中可能存在的结核分枝杆菌IgG抗体。在临床诊断中作为结核分枝杆菌感染的辅助诊断。结核分枝杆菌(MTB)是结核病的致病菌,属分枝杆菌属,是一种特殊的圆杆状细菌,细胞壁富含脂类,抗酸染色,又叫抗酸杆菌。MTB的宿主是人,主要通过结核病人含有该细菌的气溶胶(aerosol)进行传播。人体除毛发外几乎全身所有组织都可以感染结核病,如肠结核、骨结核、淋巴结核等。
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