RSR AQP4Ab试剂盒的基本工作原理讲解

更新时间：2025-11-19

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　　RSR AQP4Ab试剂盒(如RSR AQP4 Ab ELISA V2)是一种用于定量检测人血清中水通道蛋白4自身抗体(AQP4 Ab)的工具，主要用于辅助诊断视神经脊髓炎(NMO)及相关疾病谱(NMOSD)。以下是其测定步骤：

　　1.样本准备：采集患者的血清、脑脊液或其他相关液体样本作为检测材料。确保样本采集过程符合标准操作规程，避免污染和溶血等情况影响检测结果。

　　2.加样与反应

　　-加入标准品/质控品：在微孔板上相应的位置加入已知浓度的标准品或质控样品，用于建立标准曲线和监控实验的准确性。

　　-加入待测样本：将处理好的待测样本依次加入到指定的微孔中。

　　-添加AQP4-生物素：向各孔中加入溶解后的AQP4-生物素标记物，使待测样本中的抗体(AQP4 Ab)可同时与包被在微孔中的抗原(AQP4)和生物素标记的抗原结合。

　　3.孵育与洗涤

　　-室温震荡孵育：在室温下进行一定时间的震荡孵育，通常为两小时左右，以保证抗原抗体充分反应。

　　-洗板：孵育结束后，使用适当的缓冲液清洗微孔板，去除未结合的物质，以减少背景干扰。

　　4.显色反应：按照说明书的要求加入相应的酶标试剂和其他必要的成分，引发显色反应。通过酶联作用使底物转化为有色产物，颜色的深浅与样本中AQP4 Ab的浓度成正比。

　　5.测定吸光度：使用酶标仪在特定波长(如405nm、450nm)下测定各孔的吸光度值。根据标准曲线计算出待测样本中AQP4 Ab的浓度。

　　RSR AQP4Ab试剂盒的基本工作原理：

　　1.双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)：该试剂盒应用了双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验技术。具体来说，用纯化的人水通道蛋白4(AQP4)抗体包被微孔板，制成固相抗体。往包被单抗的微孔中依次加入含有AQP4Ab的水通道蛋白样本。如果样本中含有目标抗体，则会与固相上的抗体结合形成复合物。再通过加入标记有辣根过氧化物酶(HRP)的检测抗体，使其进一步与已结合在固相上的抗原-抗体复合物反应，通过显色反应来定量测定样本中的AQP4Ab水平。

　　2.特异性识别与结合：由于使用了针对特定抗原(即水通道蛋白4)的高度特异性抗体作为捕获和检测工具，因此能够确保只有与目标分子相关的免疫反应被记录下来，从而提高了检测的准确性和可靠性。

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