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单克隆抗体技术的基本原理
发布时间:2019-12-21   点击次数:180次
   单克隆抗体是目前发展快的治疗性生物大分子药物,得益于其在癌症、风湿性关节炎、传染病、心血管疾病和自身免疫疾病等方面的显著疗效,单抗药的市场快速增长。单克隆抗体可按所要求的纯度不同采用相应的纯化方法。一般采用盐析、凝胶过滤和离子交换层析等步骤达到纯化目的,也有采用较简单的酸沉淀方法。目前有效的单克隆抗体纯化方法为亲和纯化法。
  单克隆抗体是指仅识别单一抗原表位的B细胞杂交瘤产生的同源抗体,特异性好,效价高,生物活性单一,理化性状高度均一等特点。单克隆抗体已经成为生物治疗药物的主要类别。随着对生产力和成本效益要求的提高,生物产业仍然面临着许多挑战。
  单克隆抗体制备主要步骤包括:动物免疫、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选与单抗检测、杂交瘤细胞的克隆化、单抗的鉴定及制备等。单克隆抗体具有高度均一性及对靶分子的高亲和性、特异性, 已广泛应用于自身免疫性疾病、炎性疾病和癌症的治疗。单克隆抗体与相应抗原的反应性决定于其所识别的抗原表位, 确定相应表位在抗原结构上的位置是单克隆抗体筛选中的关键步骤。
  单克隆抗体技术的基本原理:
  要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,得到的骨髓瘤细胞。这种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性,也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群,可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体
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