技术文章您的位置:网站首页 >技术文章>两种测定TRAb方法的比较
两种测定TRAb方法的比较
发布时间:2022-08-15   点击次数:254次



人们普遍认为Graves病(GD)是一种自身免疫性疾病,甲亢是由于TSHR刺激性自身抗体引起的[1]。TSHR自身抗体(TRAb)根据不同的方法检测,可以得到甲状腺刺激性抗体(TSAb)、TSH结合抑制抗体(TBII)和甲状腺阻断性抗体(TSBAb)的结果。


多年来,大多数检测都是以可溶性猪TSHR为配体,通过促甲状腺激素结合抑制试验来完成检测[2]。随后,两种针对TSH结合抑制抗体(TBII)的两步检测法被引入,一种是使用猪TSHR的包被板ELISA法(CP检测),另一种是使用人TSHR的包被管测定(CT检测)。据报道,这两种方法的灵敏度和特异性都很高[3,4]。这是第一份比较使用猪TSHR的CP检测法和使用人TSHR的CT检测法的报告,两种方法检测来自甲状腺毒症和桥本甲状腺炎患者的相同血清样本。





研究目的


本研究的目的是比较两种两步检测法的性能,一种是使用纯化猪促甲状腺激素受体(猪TSHR)包被板(coated plate,CP)的ELISA检测法(TRAb ELISA),另一种是使用重组人促甲状腺激素受体(人TSHR)包被管(coated tube,CT)的放免检测法。



猪TSHR的CP酶免检测是据已发表的方法测定的(该方法缩写为ELISA)[4]。在人TSHR的CT放免检测(缩写为CT法)中,根据ROC曲线获取的阳性抑制率临界值为20%(灵敏度为99.0%,特异性为98.8%)。TSAb根据已发表的文献[5]进行检测,临界值为180%。TSBAb的正常结果是小于40%。


TgAb和TPOAb用RIA(Cosmic公司,日本)测定,正常值均为小于0.3 U/mL。


检测对象


患者的样本在Kamijo甲状腺诊所收集。所有样本采集后立即冻存,编码并进行连续检测(2个重复)。诊断依据的是临床症状,TSH,FT4,FT3,甲状腺超声,锝闪烁显像技术(Tc-99)和其他血清学数据。


检测对象:100例未经治疗的Graves病(GD)患者、30例无痛性甲状腺炎(PT)患者、10例亚急性甲状腺炎(SAT)患者和87例桥本甲状腺炎(HT)患者。


结果

在100例未经治疗的GD患者中,除一例外,其他患者血清中的TBII(TRAb)均呈现ELISA和CT放免法双阳性。


在30例PT患者血清中,1例呈ELISA单项阳性,4例呈CT法单项阳性。在1例ELISA和CT法双阳性的PT病例中,甲状腺功能亢进继发于PT,但其余的PT病例(3例CT法单阳)并未观测到相关现象。


在10例SAT患者中,有1例CT法阳性,但ELISA为阴性。


在87例HT患者中,9例为ELISA阳性(包含1例单项阳性),10例为CT法阳性(包含2例单项阳性)。


在甲状腺毒症鉴别和HT患者的阳性检出率上,两种检测方法的灵敏度和特异性基本一致,因此可以合理得出结论:在临床应用中,两种检测方法的高灵敏度可能来自方法学本身,这可能缘于两种方法学排除了TSH抗体和异嗜性抗体HAMA的影响,而与使用的促甲状腺激素受体(TSHR)的种源无关。






图1显示了未接受治疗的GD患者、PT患者、SAT患者和HT患者血清中ELISA(A)和CT法(B)的值。



在11例TRAb抗体阳性的HT患者中,4例血清样本缺失,因此我们总结剩余7例患者的临床资料和血清检测结果,见表1。这7例患者中,其中5例ELISA阳性。患者血清TgAb和TPOAb均较高或相对较高。同时,7例患者中,6例TSAb阳性,4例TSBAb阳性。7例患者中,6例表现为桥本氏甲亢。




讨论

为了比较这两种检测方法,在未经治疗的GD患者、PT患者、SAT患者和HT患者中,使用了相同的血清样本进行测定。在未经治疗的GD组中使用两种检测法测定同一组血清样品,灵敏度为99%。作者报道[4],在未经治疗的GD组中,与传统基于猪TSHR的TBII检测相比,使用猪TSHR的ELISA检测具有更高的灵敏度,特异性无差异,Costsagllola等[3]在使用人TSHR的CT检测时也有类似结论报道。事实上,使用商品化检测产品(TRAb-III,Cosmic公司,东京)对本研究中100例未经治疗的GD患者的血清进行检测,96例呈TBII阳性[4]。


接下来在PT和SAT患者中对比了ELISA和CT法。虽然在本研究中,PT和SAT患者在两种检测方法的阳性检出率差异没有统计学意义,但在本组患者中CT法比ELISA有更高的阳性倾向。正如本研究和以前的报告中显示的自身免疫性甲状腺炎患者那样,ELISA和CT法的活性在TSAb和TSBAb之间没有区别[6,7]。


总之,这些发现提示在未经治疗的GD组中,新的ELISA和CT检测方法在临床应用中的高灵敏度可能源于方法学本身,推测为TSHR包被板或包被管排除了抗TSH抗体和异嗜性抗体HAMA对检测系统的影响。Feldt-Rasmussen等[8]曾报道过,传统的TBII检测并不能预测个体患者的缓解或复发,但现在用上述两种检测方法(ELISA和CT检测方法)可以对个体患者的缓解或复发趋势进行重新评估。



参考文献:Kamijo K. TSH-receptor antibody measurement in patients with various thyrotoxicosis and Hashimoto's thyroiditis: a comparison of two two-step assays, coated plate ELISA using porcine TSH-receptor and coated tube radioassay using human recombinant TSH-receptor. Endocr J. 2003 Feb;50(1):113-6. doi: 10.1507/endocrj.50.113. PMID: 12733717.





网站首页 关于我们 新闻中心 产品中心 联系我们
备案号:   GoogleSitemap   技术支持:化工仪器网 管理登陆
天津阿斯尔生物科技有限公司(www.rsrtj.cn) 版权所有 总访问量:113285
    QQ在线客服
  •   在线咨询
  • 点击这里给我发消息
电话
86-22-83726755
手机
18622601726